轉(zhuǎn)基因食品檢測技術(shù)及方法備受關(guān)注

　　根據(jù)轉(zhuǎn)基因食品來源的不同可分為植物性轉(zhuǎn)基因食品、轉(zhuǎn)基因酵母疫苗、轉(zhuǎn)基因工程菌抗生素、動物性轉(zhuǎn)基因食品和微生物性轉(zhuǎn)基因食品。目前，我國的不少轉(zhuǎn)基因因技術(shù)屬世界領(lǐng)先水平，但應(yīng)用很少。

　　轉(zhuǎn)基因食品的檢測技術(shù)

　　由于轉(zhuǎn)基因物質(zhì)有可能在耕種、收割、運(yùn)輸、儲存和加工過程中混入食品，對食品造成偶然污染。因此，不論是對轉(zhuǎn)基因食品貼示標(biāo)簽，或是對轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因原料進(jìn)行分別輸送，轉(zhuǎn)基因原料和舊食品的檢測都是必不可少的;另外，要區(qū)分轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因食品，對轉(zhuǎn)基因食品進(jìn)行選擇性標(biāo)記，對食品中的轉(zhuǎn)基因含量的多少加以限制，也需要準(zhǔn)確有效的基因檢測技術(shù)。

　　目前，轉(zhuǎn)基因存在的檢測方法主要有prc(凝合酶鏈反應(yīng))技術(shù)、凝膠電泳測序和 elisa(酶聯(lián)免疫法)等，這些方法在食品和醫(yī)藥研究方面都有廣泛的使用，其中以prc技術(shù)最為成熟。該技術(shù)是由美國Centus公司的 Karymullis發(fā)明，于1985年由saiki等首次報(bào)道，是近年來開發(fā)的體外快速擴(kuò)增dna技術(shù)。1988年，r.k.saiki等人又成功地將熱穩(wěn)定taqdna聚合酶應(yīng)用于pcr擴(kuò)增，是pcr技術(shù)上向?qū)嵱没�的一次突破性的進(jìn)展。通過pcr技術(shù)可以簡便快速地從微量生物材料中以體外擴(kuò)增的方式獲得大量特定的核酸，并且有很高的靈敏度和特異性。pcr既可做定性又可做定量分析，目前大多以定性檢測為主，定性檢測的檢出范圍為百分之0.1。但該項(xiàng)技術(shù)的檢測結(jié)果也有可能與實(shí)際不相符合，會出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果(即檢測物質(zhì)本身含有轉(zhuǎn)基因物質(zhì)，而未被檢出;或是本身沒有轉(zhuǎn)基因物質(zhì)，而檢出有轉(zhuǎn)基因成分)。

　　由于許多獲得批準(zhǔn)的遺傳工程體(gmo)表現(xiàn)出一定的導(dǎo)入基因的性狀，因此，基因檢測也需要以蛋白質(zhì)為基礎(chǔ)的檢測技術(shù)，這就出現(xiàn)了elisa法。1971年Engvall和Perlman發(fā)表了有關(guān)酶聯(lián)免疫吸附分析法用于免疫球蛋白g(igg)定量測定的文章，使該技術(shù)發(fā)展成為液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測定方法。elisa法與pcr法相比具有操作簡單、快速、結(jié)果準(zhǔn)確，有高通量的特性，解決了轉(zhuǎn)基因檢測中樣品核酸制備的困難，同時(shí)降低了檢測成本和時(shí)間高的催化效率，可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的靈敏度和穩(wěn)定性。但該項(xiàng)技術(shù)主要應(yīng)用于原料和半成品分析，在終產(chǎn)物分析方面靈敏度底于pcr法。另外，該項(xiàng)技術(shù)還需要特殊的抗體和“新”的表達(dá)蛋白，而食品中的這類“新”蛋白質(zhì)的含量極低，且在加工過程中蛋白質(zhì)常會發(fā)生變化;該分析法同時(shí)還需要熟練的操作技術(shù)。這些因素都使elisa法在轉(zhuǎn)基因檢測應(yīng)用上受到了一定的限制。

　　轉(zhuǎn)基因食品的檢測方法

　　前轉(zhuǎn)基因的檢測方法轉(zhuǎn)基因作物檢測方法大體分為兩種：一是檢測是否含有外源蛋白，即外源基因表達(dá)產(chǎn)物，主要采用酶聯(lián)免疫吸附法和試紙條法;二是檢測是否含有外源基因(DNA)，主要有Southern雜交技術(shù)、基因芯片法和PCR檢測法。理論上來說，以上所介紹的轉(zhuǎn)基因檢測方法，只要改變相應(yīng)的檢測靶標(biāo)，都可檢測不同的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品。

　　但是實(shí)際應(yīng)用中，以檢測外源蛋白的轉(zhuǎn)基因檢測方法存大很大的局限性，食品的復(fù)雜成分會干擾檢測效果，并且加工過的轉(zhuǎn)基因食品中的蛋白質(zhì)抗原性很容易受破壞，從而會影響檢測結(jié)果的靈敏度。此外，該方法需要大量的抗體和抗原。目前，商品化的ELISA檢測試劑盒和膠體金試紙條只能檢測少數(shù)幾種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品，且一種試劑盒或試紙條只能針對某一特定轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物，不能針對多種混合成分的食品樣品進(jìn)行檢測。

　　基因水平的檢測方法具有適用范圍廣的優(yōu)勢，只要樣品中有DNA存在，就能被檢測，不受食品混合、復(fù)雜成分的干擾，適用于轉(zhuǎn)基因原料、初加工和深加工食品的檢測，而且有很好的特異性和靈敏度，已經(jīng)發(fā)展為常用的轉(zhuǎn)基因食品檢測方法。目前，所有商業(yè)化的轉(zhuǎn)基因食品都有相應(yīng)的PCR檢測方法標(biāo)準(zhǔn)。目前，轉(zhuǎn)基因 PCR檢測產(chǎn)品多數(shù)產(chǎn)自國外，價(jià)格都比較高，國內(nèi)杭州有個化工儀器網(wǎng)的平臺，轉(zhuǎn)基因檢測產(chǎn)品在算是國內(nèi)最齊全的，有儀器及配套試劑。