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移動方艙實驗室|重要！核酸檢測實驗室污染原因及最權(quán)威處理方案

[2021/3/22]

目前國內(nèi)所有二級以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測能力，大部分醫(yī)院也設(shè)立了PCR實驗室，高強度的核酸檢測任務(wù)已然成為了我們檢驗人的工作常態(tài)，但是，如果一旦出現(xiàn)實驗室污染，可能會造成假陽性結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)果不可信，甚至可能會危及實驗室工作人員安全。

應(yīng)對核酸檢測實驗室污染的最好辦法就是防范于未然，今天就帶大家了解一下實驗中我們?nèi)绾伪苊夂蜏p少污染的產(chǎn)生以及處理污染。
圖片




一、污染的產(chǎn)生




在新冠病毒核酸檢測過程中 ，常見以下幾種污染類型 ：擴 增片段的污染 （ 產(chǎn)物污染 ） ；天然基因組 DNA 的污染、試劑 污 染 （ 貯存液或工作液 ） 以及樣本間交叉污染 。核酸檢測實驗室 污染的主要來源是擴增產(chǎn)物的污染 。

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實驗室應(yīng)通過以下途徑及時發(fā)現(xiàn)污染 ：

1、采用每次檢測過程至少3個陰性對照隨機置于臨床樣本中間參與提取全過程。

2、每天對實驗室內(nèi)空氣進行采樣監(jiān)測�？諝獗O(jiān)測范圍應(yīng)至少應(yīng)包括樣本制備區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

3、定期對實驗室臺面、門把手、儀器設(shè)備表面進行取樣監(jiān)測。

4、陽性樣本采用另外一到兩種更為靈敏且擴增不同區(qū)域的核酸檢測試劑對原始樣本進行復(fù)核檢測。




二、污染的防控




01

嚴格實驗室功能分區(qū)


原則上新冠病毒核酸檢測實驗室應(yīng)當設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增和產(chǎn)物分析區(qū)。

根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并。各區(qū)域在物理空間上應(yīng)當是完全相互獨立的。傳遞窗滿足密封性要求，不能有空氣的直接相通。各項檢測工作應(yīng)嚴格按相應(yīng)規(guī)定在各自的區(qū)域內(nèi)進行，嚴禁在樣本制備區(qū)配制試劑。

圖片

各區(qū)的功能是：

1、試劑儲存和準備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。

2、樣本制備區(qū)：轉(zhuǎn)運箱的開啟，樣本的滅活（適用時），核酸提取及其加入至擴增反應(yīng)管等。

3、擴增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴增和產(chǎn)物分析。

02

確保實驗室人、物及空氣單向流動


核酸檢測實驗室的人、物及空氣流向按照試劑儲存和準備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增和產(chǎn)物分析區(qū)，防止擴增產(chǎn)物隨人流、物流及空氣進入擴增前的區(qū)域。空氣流向應(yīng)按照從試劑儲存和準備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行。
目前國內(nèi)所有二級以上綜合醫(yī)院都具備了核酸檢測能力，大部分醫(yī)院也設(shè)立了PCR實驗室，高強度的核酸檢測任務(wù)已然成為了我們檢驗人的工作常態(tài)，但是，如果一旦出現(xiàn)實驗室污染，可能會造成假陽性結(jié)果，導(dǎo)致結(jié)果不可信，甚至可能會危及實驗室工作人員安全。

應(yīng)對核酸檢測實驗室污染的最好辦法就是防范于未然，今天就帶大家了解一下實驗中我們?nèi)绾伪苊夂蜏p少污染的產(chǎn)生以及處理污染。
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一、污染的產(chǎn)生




在新冠病毒核酸檢測過程中 ，常見以下幾種污染類型 ：擴 增片段的污染 （ 產(chǎn)物污染 ） ；天然基因組 DNA 的污染、試劑 污 染 （ 貯存液或工作液 ） 以及樣本間交叉污染 。核酸檢測實驗室 污染的主要來源是擴增產(chǎn)物的污染 。

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實驗室應(yīng)通過以下途徑及時發(fā)現(xiàn)污染 ：

1、采用每次檢測過程至少3個陰性對照隨機置于臨床樣本中間參與提取全過程。

2、每天對實驗室內(nèi)空氣進行采樣監(jiān)測。空氣監(jiān)測范圍應(yīng)至少應(yīng)包括樣本制備區(qū)和擴增產(chǎn)物分析區(qū)。

3、定期對實驗室臺面、門把手、儀器設(shè)備表面進行取樣監(jiān)測。

4、陽性樣本采用另外一到兩種更為靈敏且擴增不同區(qū)域的核酸檢測試劑對原始樣本進行復(fù)核檢測。




二、污染的防控




01

嚴格實驗室功能分區(qū)


原則上新冠病毒核酸檢測實驗室應(yīng)當設(shè)置以下區(qū)域：試劑儲存和準備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴增和產(chǎn)物分析區(qū)。

根據(jù)使用儀器的功能，區(qū)域可適當合并。各區(qū)域在物理空間上應(yīng)當是完全相互獨立的。傳遞窗滿足密封性要求，不能有空氣的直接相通。各項檢測工作應(yīng)嚴格按相應(yīng)規(guī)定在各自的區(qū)域內(nèi)進行，嚴禁在樣本制備區(qū)配制試劑。

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各區(qū)的功能是：

1、試劑儲存和準備區(qū)：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應(yīng)混合液的制備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。

2、樣本制備區(qū)：轉(zhuǎn)運箱的開啟，樣本的滅活（適用時），核酸提取及其加入至擴增反應(yīng)管等。

3、擴增和產(chǎn)物分析區(qū)：核酸擴增和產(chǎn)物分析。

02

確保實驗室人、物及空氣單向流動


核酸檢測實驗室的人、物及空氣流向按照試劑儲存和準備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增和產(chǎn)物分析區(qū)，防止擴增產(chǎn)物隨人流、物流及空氣進入擴增前的區(qū)域。空氣流向應(yīng)按照從試劑儲存和準備區(qū)→樣本制備區(qū)→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)方向空氣壓力遞減的方式進行。
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